Leica DS9800 Tool Storage User Manual


 
DS9800
Page 14
Bond
Polymer Rene Detection
Artikelnummer: DS9800
Avsedd Användning
Detektionssystemet är avsett för diagnostik in vitro.
Bond Polymer Rene Detection är ett biotinfritt polymeriskt antikroppskonjugatsystem med HRP-länkare (pepparrotsperoxidas) för att
detektera vävnadsbundna primära antikroppar, IgG från mus och kanin samt vissa IgM från mus. Substansen är avsedd för infärgning av
formalinxerade och parafninbäddade vävnadssnitt med det automatiserade Bond
TM
-systemet.
Den kliniska tolkningen av eventuell färgning eller utebliven sådan ska kompletteras med morfologiska studier och vederbörliga
kontroller. Dessa ska utvärderas av kompetent patolog med hänsyn tagen till patientens anamnes och övriga diagnostiska testresultat.
Bond Polymer Rene Detection Kit ska användas inom ramen för laboratoriets gällande beprövade rutiner vid användning av
vävnadskontroller. För att säkra resultaten ska laboratoriet färga varje patientprov med positiva, negativa och övriga vävnadsspecika
kontroller efter behov.
Förklaring och Sammanfattning
Med immunhistokemiska metoder kan man påvisa förekomsten av antigen i vävnad och celler (se “Använda Bond-reagens” i
användardokumentationen från Bond).
Bond Polymer Rene Detection utnyttjar en ny teknik för kontrollerad polymerisering för att förbereda polymeriska antikroppskonjugat
med HRP-länkare. Detektionssystemet använder då varken streptavidin eller biotin, och eliminerar därigenom icke-specik infärgning till
följd av endogent biotin.
Bond Polymer Rene Detection används så här:
Provet inkuberas med väteperoxid för att förhindra endogen peroxidasaktivitet.
En av användaren bestämd specik primär antikropp används.
Postprimär IgG-länkarreagens lokaliserar antikroppar från mus.
Poly-HRP IgG-reagens lokaliserar antikroppar från kanin.
Färgämnessubstratet, 3,3’-Diaminobenzidintetrahydroklorid hydrat (DAB), visualiserar komplexet genom en brun fällning.
Hematoxylin (blått) som motfärgning medger visualisering av cellkärnor.
Användning av Bond Polymer Rene Detection i kombination med det automatiserade Bond-systemet minskar risken för fel till följd av
den mänskliga faktorn och den inneboende variation som uppkommer genom att varje analytiker späder reagens, pipetterar manuellt
och applicerar reagens med sin egen, specika teknik.
Ingående Reagens
Reagens för 200–300 tester
1. Peroxide Block (30 ml) 3–4% (v/v) väteperoxid.
2. Post Primary (30 ml) Anti-mus-IgG från kanin (<10 μg/mL) i 10 volymprocent djurserum i tris-buffrad koksaltlösning/0,09 % ProClin™ 950.
3. Polymer (30 ml) Anti-kanin-Poly-HRP-IgG (<25 μg/mL) innehållande 10 volymprocent djurserum i tris-buffrad koksaltlösning/0,09 %
ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2.4 ml) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidintetrahydroklorid hydrat i stabilisatorlösning.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) väteperoxid i stabilisatorlösning.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) väteperoxid i stabilisatorlösning.
7. Hematoxylin (30 ml) <0,1% hematoxylin.
Spädning och Blandning
Bond Polymer Rene Detection har optimerats för Bond-systemet. Dessa reagens behöver varken rekonstitueras, blandas, spädas eller
titreras.
Nödvändig Materiel Som Ej Medföljer
I “Använda Bond-reagens” i Bond-användardokumentationen nns en fullständig lista med den materiel du behöver för att behandla ett
prov och göra en immunhistokemisk färgning med Bond-systemet.
Förvaring och Stabilitet
Förvaras vid 2–8 °C. Får ej frysas. Använd inte efter det bäst-före-datum som anges på brickhandtagets etikett. Ställ tillbaka i 2–8 °C
omedelbart efter bruk.
Det nns inga omedelbara tecken man kan använda för att avgöra instabilitet i produkten. Därför bör både positiva och negativa
kontrollprov göras med okända prover (se “Kvalitetskontroll” i “Använda Bond-reagens” i Bonds användardokumentation).
Om en onormal infärgning, som inte kan förklaras med variationer i laboratoriemetoderna, uppträder och du misstänker problem med
detektionssystemet kontaktar du omedelbart en lokal distributör eller ett regionkontor för Leica Biosystems.
Andra förvaringsförhållanden än de ovan angivna måste först verieras av användaren
1
.