Leica DS9800 Tool Storage User Manual


 
DS9800
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Bond
Polymer Rene Detection
N. catalogo: DS9800
Uso Previsto
Questo sistema di determinazione è destinato unicamente all’uso diagnostico in vitro.
Bond Polymer Rene Detection è un sistema coniugato di anticorpi linker di perossidasi di tafano polimeriche (HRP) senza biotina per
il riconoscimento delle IgG di topo e coniglio legate ai tessuti e di alcuni anticorpi primari IgM di topo. È destinato alle sezioni per la
colorazione di tessuto ssato in formalina e incluso in parafna nel sistema automatico Bond
TM
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L’interpretazione clinica di qualsiasi colorazione o della sua assenza va integrata da studi morfologici e controlli adeguati.
I risultati devono essere valutati da un patologo qualicato, nell’ambito degli antecedenti clinici del paziente e di altri test diagnostici.
Il kit di rilevamento Bond Polymer Rene Detection Kit deve essere utilizzato seguendo la migliore pratica di laboratorio relativa ai
controlli dei tessuti. Per sicurezza, i laboratori devono colorare ciascun campione del paziente insieme ai controlli positivi, negativi o ad
altri controlli tessuto-specici, secondo le necessità.
Sommario e Spiegazione
Le tecniche immunoistochimiche possono essere utilizzate per determinare la presenza di antigeni nei tessuti e nelle cellule (vedi
“Utilizzo dei reagenti Bond” nella documentazione Bond per l’utente).
Bond Polymer Rene Detection sfrutta una tecnologia di polimerizzazione innovativa per preparare i coniugati di anticorpi polimerici
linker HRP. Evitando il ricorso alla streptavidina e alla biotina, il sistema di rivelazione ovvia al fenomeno della colorazione non specica
per effetto della biotina endogena.
Bond Polymer Rene Detection si basa sul seguente principio di funzionamento:
Incubazione del campione con perossido di idrogeno per inibire l’attività perossidasica endogena.
Applicazione di un anticorpo specico primario fornito dall’utente.
Localizzazione degli anticorpi murini da parte del reagente post primario con linker IgG.
Localizzazione degli anticorpi di coniglio da parte del reagente IgG HRP polimerico.
Il complesso di substrato cromogeno 3,3’-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato (DAB), visualizza il complesso tramite un
precipitato di color marrone.
La controcolorazione all’ematossilina (blu) permette la visualizzazione dei nuclei cellulari.
Il ricorso al Bond Polymer Rene Detection unitamente al sistema automatizzato Bond riduce la possibilità di errore umano e la
variabilità insita nelle operazioni manuali di diluizione del singolo reagente, pipettaggio e applicazione del reagente.
Reagenti Forniti
Reagenti sufcienti per 200–300 test
1. Peroxide Block (30 ml) perossido d’idrogeno al 3–4% (v/v).
2. Post Primary (30 ml) IgG di coniglio anti-topo (<10 μg/mL) in siero animale al 10% (v/v) in soluzione salina tamponata con Tris/
ProClin™ 950 allo 0,09%.
3. Polymer (30 ml) Poly-HRP-IgG anti-coniglio (<25 μg/mL) contenente siero animale al 10% (v/v) in soluzione salina tamponata con
Tris/ProClin™ 950 allo 0,09%.
4. DAB Part 1 (2.4 ml) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato, in soluzione stabilizzante.
5. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) perossido d’idrogeno in soluzione stabilizzante.
6. DAB Part B (30 ml) ≤0,1% (v/v) perossido d’idrogeno in soluzione stabilizzante.
7. Hematoxylin (30 ml) ematossilina allo <0,1%.
Diluizione e Miscelazione
Bond Polymer Rene Detection è ottimizzato per l’uso con il sistema Bond. Non è necessario provvedere alla ricostituzione,
miscelazione, diluizione o titolazione di questi reagenti.
Materiale Necessario Non Fornito
Per un elenco completo dei materiali richiesti per il trattamento dei campioni e per la colorazione immunoistochimica tramite sistema
Bond, consultare la sezione “Utilizzo dei reagenti Bond” nella documentazione Bond per l’utente.
Conservazione e Stabilità
Conservare a 2–8 °C. Non congelare. Non utilizzare dopo la data di scadenza riportata sull’etichetta apposta sull’impugnatura del
vassoio. Riportare i reagenti ad una temperatura di 2–8 °C subito dopo l’uso.
Non esistono segni evidenti che indicano l’instabilità del prodotto. Si consiglia pertanto di eseguire simultaneamente controlli positivi
e negativi con campioni sconosciuti (consultare il paragrafo “Controllo di qualità” nella sezione “Utilizzo dei reagenti Bond” della
documentazione Bond per l’utente).
Qualora venga riscontrata una colorazione inattesa e tale da non poter essere giusticata con variazioni nelle procedure di laboratorio
e da motivare un sospetto di inefcienza del sistema di rivelazione, contattare immediatamente il distributore locale o la sede di zona di
Leica Biosystems.
Ogni condizione di conservazione diversa da quanto sopra prescritto dovrà essere preventivamente vericata dall’utente
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